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在NK细胞培养中自体血浆升级处理方案

发布时间:2022-03-07 15:18:27 浏览量:771

在免疫细胞培养时,需采集人外周血,分离血浆及PBMC,经过体外细胞因子及培养液的扩增,得到符合临床要求的免疫细胞。

灏洋实验室一直致力于为客户提供高品质的培养液产品及方案。在进行血浆处理时,添加钙离子可使促使血浆释放多种细胞因子,有利于淋巴细胞的培养。

Ø  操作方法

1.    获得人抗凝外周血或脐带血(50 ml以上),于2-4 h内进行分离操作。

2.    在高效离心管中加入15 ml样本密度分离液(TBD,货号HY2015),抗凝血(20-25 ml)缓慢加入至分离液上方,使之形成明显的分层界面。600 g慢升慢降离心30 min

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3.    用吸管小心从上至下分别取出血浆层、PBMC白环层。

4.    血浆中加入8%体积的葡萄糖酸钙溶液,反复冻融3次,离心去掉沉淀,上清液可用于细胞培养(对照组血浆56℃灭活30 min)。

              5.    按照人NK细胞体外培养实验方案(TBD,货号TBDNK2013-S)继续培养。

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  Ø  实验结果

实验组NK细胞增殖数量相比对照组提高5%-10%(平均数据)。

Ø  实验结论

建议客户处理血浆时,添加葡萄糖酸钙溶液,有利于NK细胞收获的质量。



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